中藥復方怎么發(fā)高分？高通量測序提分利器 Journal of Proteome Research: 蛋白質組學技術揭示中藥復方疏風解毒膠囊治療急性肺損傷的分子機制
中藥復方怎么發(fā)高分？高通量測序提分利器
Journal of Proteome Research: 蛋白質組學技術揭示中藥復方疏風解毒膠囊治療急性肺損傷的分子機制
在我國，中醫(yī)藥已廣泛應用于各種疾病的治療，如板藍根和柴胡等。通常，中藥復方包括多種類型的中藥。一種或幾種草藥作為君藥發(fā)揮主要作用，其余草藥作為臣藥，輔助增強君藥的作用。單一中藥的成分已經相當復雜，更何況多種中藥配伍而成的中藥復方。長久以來，盡管西方醫(yī)學非常關注中醫(yī)藥的療效，但中藥復方方面的研究成果卻很難再國際頂尖的專業(yè)期刊上發(fā)表。究其原因無非是有效成分無法確定。那么如何突破這一瓶頸呢？下面這篇文章，可能給我們一些啟發(fā)。
2017年10月，Journal of Proteome Research在線發(fā)表了中藥復方疏風解毒膠囊治療急性肺損傷分子機制的文章“Therapeutic Mechanistic Studies of ShuFengJieDu Capsule in an Acute Lung Injury Animal Model Using Quantitative Proteomics Technology”. 下面我們來看一下這篇文章的研究思路。
首先，作者用UPLC/Q-TOF方法結合串聯(lián)MS，分析了疏風解毒膠囊的有效成分，鑒定出96個色譜峰，對應94種化合物。為了進一步鑒定疏風解毒膠囊在抗炎過程的有效成分，作者運用NF-kB雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)，結合PharmMapper及MAS3.0，篩選出潛在的10種抗炎活性物質及潛在的藥物作用靶點。然后，作者進一步通過體內試驗驗證上述靶點。選用SPF級別雄性SD大鼠，分成3組：空白對照組（不做任何處理），模型組（LPS誘導急性肺損傷(ALI)模型，并用生理鹽水處理）及治療組（LPS誘導ALI,并用疏風解毒膠囊治療）。在處理的第1,3和5天，從三組中隨機選取3只大鼠，提取肺組織，進行HE染色及蛋白質組分析。作者應用多維蛋白質鑒定技術（MudPIT）和定量蛋白質組學技術（Label-free quantification）,得到了疏風解毒膠囊治療大鼠ALI的差異表達蛋白數據。通過對差異表達蛋白進行生物信息學分析，明確了AKT1在疏風解毒膠囊治療大鼠ALI中的核心調控作用，并通過進一步的分子生物學方法，驗證了多條免疫與炎癥相關信號通路參與疏風解毒膠囊治療ALI的調控過程。
研究路線
實驗結果如下
圖一，研究流程圖
圖二，全蛋白質組分析ALI模型肺組織經疏風解毒膠囊處理后的蛋白質組變化并通過分子生物學方法驗證
圖三，全蛋白質組分析ALI模型巨噬細胞經疏風解毒膠囊處理后的蛋白質組變化
圖四，疏風解毒膠囊處理后巨噬細胞中重要差異蛋白的分子生物學驗證
圖五，疏風解毒膠囊治療ALI的分子機制預測
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